Precauciones para la tinción de Papanicolaou

HealthSky proporciona kits de tinción de Papanicolaou diseñados para la coloración de frotis ginecológicos y no ginecológicos, siguiendo la técnica desarrollada por George Papanicolaou.

La tinción de Papanicolaou comprende cuatro pasos fundamentales:

1. Fijación

2. Tinción nuclear

3. Tinción citoplasmática

4. Aclaración

Los principales requisitos de la tinción son:

1. Definición nuclear clara

2. Alta transparencia del fondo

3. Diferenciación cromática adecuada

Con base en estos criterios, deben considerarse las siguientes precauciones y posibles errores:

Problemas en la tinción nuclear

(1) Tinción nuclear débil:

• Diferenciación con HCl excesivamente prolongada o tiempo de tinción con hematoxilina demasiado corto. → Ajustar reduciendo el tiempo de diferenciación o prolongando el azulado; añadir diariamente hematoxilina fresca o preparar una nueva solución.

• Secado del frotis antes de la fijación. → Cumplir estrictamente con la fijación húmeda inmediata.

• Agua de lavado con pH ligeramente ácido. → Utilizar solución alcalina.

(2) Tinción nuclear intensa:

• Concentración insuficiente de la solución de HCl. → Aumentar ligeramente la concentración.

• Fijación con alcohol >95%, lo que provoca sobretinción. → Utilizar alcohol al 95% para la fijación.

Problemas en la tinción citoplasmática

• Tinción citoplasmática general débil. → Prolongar el tiempo de tinción o renovar la solución.

• Citoplasma homogéneamente rojo claro sin diferenciación. → Puede deberse a secado previo al fijado o a contaminación bacteriana. Extender el tiempo de tinción puede mejorar parcialmente.

• Citoplasma gris o púrpura. → Se debe a hematoxilina excesiva o diferenciación insuficiente con HCl. Re-tinción con hematoxilina tras decoloración corrige el defecto.

• Variabilidad de muestras: la misma solución EA puede mostrar predominio azul, verde o rojo. → Utilizar EA36/EA50 en muestras ginecológicas y EA65 o EA modificada en no ginecológicas.

• pH inadecuado de la solución EA:

• Si tiñe en exceso de rojo → Añadir ácido fosfotúngstico.

• Si tiñe uniforme en azul/verde → Añadir carbonato de litio saturado.

• En EA modificada → Añadir 2 ml de ácido acético glacial por 100 ml de solución para mejorar la tinción y prolongar su estabilidad.